Ngày 12 tháng 10 năm 2020, Điều lệ giải được ban hành, theo đó có 10 câu lạc bộ/đội tham dự, gồm: Bắc Ninh, Hải Nam Vĩnh Phúc, Bến Tre, Trẻ Long An, Trẻ Quảng Nam, Luxury Hạ Long, Phú Yên, Sơn La, Trẻ Viettel và Trẻ Tây Ninh. Tuy nhiên Trẻ Long An xin rút khỏi giải, và đội thay thế là PVF B. Theo thông báo của VFF ngày 9 tháng 11 năm 2020, theo đề nghị của Liên đoàn Bóng đá tỉnh Sơn La, Liên đoàn Bóng đá Việt Nam chấp thuận cho đội Sơn La không tiếp tục tham dự giải do không thể hoàn thiện được các thủ tục và công tác tổ chức. [1] Vì vậy giải chỉ còn 9 đội tham gia. 9 đội được chia làm 2 bảng theo khu vực địa lý, thi đấu vòng tròn một lượt tính điểm xếp hạng. Hai đội xếp thứ nhất tại hai bảng sẽ giành quyền tham dự giải Hạng Nhì 2021.